UDC 579.842.23+ 616-092.19
ت. Starovoitova ، T.A. إيفانوفا ، ج. Mukhturgin، S.A. فيتيازيفا ، ف. دوبروفينا ،
كم. كوريتوف ، S.V. بالاخونوف
التغيرات في التركيب الخلوي للسوائل الفموية للفئران البيضاء أثناء العملية المعدية التي تسببها بكتيريا يرسينيا مع تكوين بلازمي مختلف
معهد أبحاث إيركوتسك لمكافحة الطاعون في سيبيريا والشرق الأقصى (إيركوتسك)
تقدم المقالة بيانات عن تأثير تركيبة البلازميد لميكروب الطاعون على التركيب السكاني الفرعي للخلايا أحادية النواة في السائل البريتوني للفئران البيضاء على التواريخ المبكرةعملية معدية. تبين أن التغيير في التركيب الخلوي للسائل البريتوني لحيوانات التجارب يعتمد على المظهر البلازميد لسلالات ميكروب الطاعون. خلال التجربة ، تم الكشف أيضًا عن مراحل في التغيير في التركيب الكمي للخلايا البدينة في السائل البريتوني للفئران البيضاء المصابة بسلالات Yersinia pestis ذات الطيف البلازميدي المختلف. الكلمات المفتاحية: اليرسينيا الطاعونية ، السائل البريتوني ، الفوعة
تغيرات في المكونات الخلوية للسائل الفوقي للفئران البيضاء المصابة بالعدوى التي تسببها بكتيريا يرسينيا مع بروفيلات بلازميد مختلفة
ت. ستاروفويتوفا ، ت. إيفانوفا ، ج. Mukhturgin، S.A. فيتيازيفا ، ف. دوبروفينا ،
كم. كوريتوف ، S.V. بالاخونوف
معهد إيركوتسك لبحوث أنتيبلاج في سيبيريا والشرق الأقصى ، إيركوتسك
تقدم المقالة بيانات عن تأثير ملف Yersinia pestis plasmid على التركيب السكاني الفرعي للخلايا أحادية النواة للسائل البريتوني للفئران في المراحل المبكرة من العملية المعدية. تبين أن تغيير التركيب الخلوي للسائل البريتوني لحيوانات التجارب يعتمد على المظهر البلازميدي لسلالات اليرسينيا الطاعونية. تم تحديد طبيعة الطور في تغيرات التركيب الكمي للخلايا البدينة للسائل البريتوني للفئران البيضاء المصابة بسلالات Y. pestis مع طيف بلازميد مختلف. الكلمات المفتاحية: اليرسينيا الطاعونية ، السائل البريتوني ، الفوعة
ترتبط الغالبية العظمى من عوامل فوعة اليرسينيا الطاعونية بتكوين البلازميد. يحتوي جينوم مسبب الطاعون من الأنواع الفرعية الرئيسية - Yersinia pestis subspecies - على ثلاثة بلازميدات - pYY (45MDa) و pYP (6MN) و pYT (61MDa) ، وكان دورها في تنفيذ الخصائص المسببة للأمراض في يرسينيا جيدًا درس. مع وجود بلازميد pYV ، تظهر سلالات Yersinia العديد من السمات المظهرية: التصاق الخلية ، التراص التلقائي ، التراص السطحي ، وكذلك تخليق بروتينات الغشاء الخارجي ، بما في ذلك V- و W- المستضدات والبروتينات الأخرى ، والتي يكون تأثيرها يهدف إلى قمع نشاط الخلايا البلعمية. جهاز المناعة. تعتبر البلازميدات pYP و pYT من النوع vidospecific. يحدد Plasmid pYP تخليق مبيد البكتيريوسين 1 ومنشط البلازمينوجين ، ويشفر البلازميد pYT اثنين من أكثر عوامل الضراوة المدروسة جيدًا - سم الفأر وكبسولة F1. السمة المميزة للعامل الممرض المنتشر في بؤرة Tuva هو وجود في جينومه بلازميد رابع إضافي pTR33 مع وظائف غير واضحة حتى الآن. يُعتقد أن هذا البلازميد عبارة عن بلازميد مقيم معدل وراثيًا 9.5 كيلو دالتون يحمل جينات pla (منشط البلازمينوجين) و pstl (pesticin 1). يؤدي فقدان البلازميد إلى تغيير في الخصائص الكيميائية الحيوية والثقافية ، وكذلك إلى نقص أو فقدان كامل لضراوة العامل الممرض.
العلامة السريرية الرائدة لعدوى الطاعون والتسمم ، والتي تحدد شدة الدورة
ونتائج المرض هي انتهاك لاستتباب الكائنات الحية الدقيقة. الأهداف الأساسية للسموم الداخلية هي كريات الدم البيضاء متعددة الأشكال ، الضامة ، وحيدات ، الخلايا البطانية والعناصر الخلوية الأخرى. يمكن اعتبار التغييرات في التركيب الخلوي للسائل البريتوني معيارًا تشخيصيًا لشدة المرض في العديد من الأمراض ، بما في ذلك الطاعون. في هذا الصدد ، فإن تقييم التركيب الخلوي الكمي والنوعي للسائل البريتوني في الفئران البيضاء ذات العملية المعدية التي تسببها Y. pestis بتكوين بلازميد مختلف له أهمية كبيرة.
الغرض من العمل: دراسة ديناميكيات التغيرات في التركيب السكاني للخلايا وحيدة النواة في السائل البريتوني للفئران البيضاء في المراحل المبكرة من عدوى الطاعون التجريبية.
المواد والأساليب
كان النموذج التجريبي في التجارب 175 نسلًا ، ولكنه قياسي من حيث شروط الحفظ ووزن (18-20 جم) من الفئران البيضاء من كلا الجنسين. تم سحب الحيوانات من التجربة وفقًا لـ "قواعد الممارسة المعملية في الاتحاد الروسي"، الذي تمت الموافقة عليه بأمر من وزارة الصحة في الاتحاد الروسي رقم 267 بتاريخ 19 يونيو 2003 ، والمعيار الوطني للاتحاد الروسي GOST R 53434-2009" مبادئ الممارسة الجيدة للمختبرات ".
استخدمنا 6 سلالات من Y. pestis subsp. الطاعون و Y. pestis subsp. altaica من مجموعة Ir-
الجدول 1
خصائص السلالات المختبرة من ميكروب الطاعون
سلالة مكان العزلة تكوين البلازميد الفوعة للفئران البيضاء (RbO) ، ماجستير.
Y. pestis subsp. pestis I-2638 تركيز طاعون طبيعي من Tuva pYP + pYV + pTP33 + pYT + 10 / شديد الضراوة
Y. pestis subsp. pestis I-3479 معهد إيركوتسك لمكافحة الطاعون pYP + pYV-pTP33 + pYT + عديم الفوعة
Y. pestis subsp. pestis I-3480 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP-pYV-pTP33 + pYT + عديم الفوعة
Y. pestis subsp. Altaica I-2359 Gorno-Altai تركيز الطاعون الطبيعي pYP + pYV + pYT + 4 x 104 / ضعيف الضراوة
Y. pestis subsp. altaica I-2948 التركيز الطبيعي للطاعون Gorno-Altai pYP-pYV + pYT + 3 x 108 / الفوعة المتبقية
Y. pestis subsp. altaica I-2948/3 معهد إيركوتسك لمكافحة الطاعون pYP-pYV-pYT + عديم الفوعة
معهد كوتسك لأبحاث مكافحة الطاعون في Rospotrebnadzor (الجدول 1).
تم تقسيم الفئران البيضاء السليمة إلى 6 مجموعات تجريبية ومجموعة واحدة ضابطة مكونة من 25 فأر لكل مجموعة. أصيبت حيوانات المجموعات التجريبية ببكتيريا Y. pestis بتركيز 1 x 106 mc في حجم 0.5 ml بالطريقة داخل الصفاق. تم حقن المجموعة التجريبية الأولى من الحيوانات بثقافة لمدة يومين من Y. pestis subsp. نمت عند درجة حرارة 28 درجة مئوية. pestis I-2638 ، المجموعة الثانية - Y. pestis subsp. pestis I-3479 ، المجموعة الثالثة - Y. pestis subsp. pestis I-3480، IV اصيبت مجموعة من الحيوانات التجريبية بسلالة Gorno-Altai المرجعية من Y pestis subsp. altaica I-2359 ، المجموعة الخامسة - Y. pestis subsp. altaica I-2948 ، المجموعة السادسة - مع سلالة مختارة من Y. pestis subsp. ألتيكا I-2948/3.
تم أخذ عينات المواد من حيوانات التجارب (السائل البريتوني) بعد 30 و 60 و 90 و 120 و 180 دقيقة. تم حساب العدد الإجمالي للخلايا النووية في 1 مل من السائل البريتوني في مستحضرات ثابتة ملطخة بالطرق القياسية. للتحليل الجرثومي ، تم تلقيح الدم من القلب والسائل البريتوني (0.1 مل لكل منهما) على وسط مغذي صلب (Hottinger agar ، pH 7.2).
تم استخدام طرق المسح المجهري في العمل. تم إجراء التقييم الكمي للعدد الإجمالي للكريات البيض باستخدام طريقة موحدة لعد الخلايا في غرفة Goryaev. نسبة مئوية أنواع مختلفةتم إجراء الكريات البيض بطريقة الفحص المورفولوجي للسائل البريتوني في المسحات. في دراسة الأدوية باستخدام برنامج الكمبيوتر "MoticImagesPlus" (الإصدار 2) ، تم إجراء تعداد متباين للخلايا القاعدية في الأنسجة (TC) ، وتم قياس قطرها ومساحتها. تم تقييم درجة تنشيط MC بواسطة مؤشر التحلل الخلوي (IDTC) - النسبة المئوية للخلايا القاعدية للصاري المحبب إلى عددها الإجمالي.
تم إجراء تحليل تلقائي للصور باستخدام مجهر ضوئي Zeiss (ألمانيا) بكاميرا فيديو Moticam 2000 ، بدقة 1392 × 1040 بكسل ، تقريبًا. 10 ، المجلد. مائة.
تم الحصول على أهمية نتائج الدراسة بالطرق الرياضية للمعالجة الإحصائية باستخدام تحليل مقارنبواسطة اختبار الطالب واستخدام برنامج الكمبيوتر Statistica ، الإصدار 6.0 (StatSoft Inc. 19842001 ، IPHI 31415926535897) وحزمة البرامج
مايكروسوفت أوفيس إكسل (2003). تم اعتبار النتائج مهمة فيما يتعلق بالتحكم في p< 0,05.
نتائج ومناقشة
إجمالي عدد الخلايا في السائل البريتوني في الحيوانات السليمة هو 4.3 ± 0.9 × 103 في 1 سم 3 ، بينما الضامة هي نوع الخلية السائد وتمثل 60.5 ± 5.6٪ من الإجمالي 17.0 ± 2.8٪ ؛ 5.5 ± 0.8٪ عبارة عن خلايا ظاهرية وعناصر خلوية أخرى.
في الفئران البيضاء المصابة ، لوحظت الطور في التغيير في العدد الإجمالي للخلايا النووية. في الحيوانات المصابة بسلالة خبيثة من Y. pestis subsp. pestis I-2638 ، بعد 30 دقيقة ، يزداد العدد الإجمالي للخلايا النووية بشكل حاد إلى 1.5 ± 0.4 × 104 في 1 سم 3 ، وهو أعلى بمقدار 3.4 مرات من الحيوانات السليمة. بحلول 60 دقيقة من الدراسة ، تنخفض المؤشرات إلى القيم السليمة ، وتستمر في الانخفاض في الفترات اللاحقة. الصورة الخلوية للسائل البريتوني لها علاقة واضحة بالثقافة المعدية. في حيوانات المجموعة الأولى ، بعد 30 دقيقة من الإصابة ، لوحظ زيادة في عدد الخلايا الليمفاوية ، متجاوزة القيمة في الحيوانات السليمة بمقدار 4 مرات بسبب الانخفاض الحاد في عدد الخلايا الوحيدة. تم الكشف عن هذه التغييرات في جميع فترات المراقبة. في السائل البريتوني للفئران البيضاء المصابة بـ Y. pestis subsp. pestis I-2638 ، بعد 120 دقيقة من بداية التجربة ، تم تسجيل زيادة في عدد العدلات المجزأة بمقدار 2.5 مرة ، مقارنة مع مجموعة التحكم (p< 0,05), и незначительное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов. На последнем сроке исследования в мазках перитонеальной жидкости выявляется большое количество фибробластов, агрегация лимфоцитов и большое количество делящихся клеток.
الفئران البيضاء المصابة بـ Y. pestis subsp. altaica I-2359 ، Y. pestis subsp. الطاعون I-3479 و Y. pestis subsp. altaica I-2948/3 ، بعد 30 دقيقة من بدء التجربة ، لم تكن هناك تغييرات ذات دلالة إحصائية. بحلول 180 دقيقة ، يتجاوز عدد الخلايا النووية في الإفرازات البريتونية قيم التحكم بمقدار 2.8 (ص< 0,01), 1,9 (р < 0,05) и 1,5 раза соответственно. При введении животным Y. pestis subsp. pestis И-3480 и Y. pestis subsp. altaica И-2948 через 30 мин отмечается повышение общего числа ядерных клеток с последующим снижением (120 мин) до уровня контроля, и к 180 мин показатель вновь увеличивается.
عند عرض مسحات من السائل البريتوني في الحيوانات من جميع المجموعات التجريبية ، يتم تسجيل تكاثر الخلايا في الخلايا الليمفاوية ، المنسجات ، زيادة الحمضات ، الخلايا القاعدية للأنسجة ، خلايا البلازما ، الخلايا الظهارية والخلايا الليفية.
تقييم الخصائص المورفولوجية للخلايا القاعدية وعددها ونشاطها الوظيفي مهم في دراسة التركيب الخلوي للسائل البريتوني للحيوانات المصابة.
لقد ثبت أنه في الفئران البيضاء التجريبية هناك مرحلة في التغيير في التركيب الكمي للخلايا القاعدية لأنسجة السائل البريتوني. زيادة أعدادها في الحيوانات المصابة بـ Y. pestis subsp. pestis I-2638 ، يتم تسجيله بعد 60 دقيقة من إدخال المزرعة ، متجاوزًا القيم في الحيوانات السليمة بمقدار 2.6 مرة (p< 0,05). Затем данные показатели снижаются (90-120 мин) до значений ин-тактных животных, к 180 мин вновь возрастают, достигая значений 8,5 против 2,5 в контроле (р < 0,05). Часть ТК представлены интестинальными - незрелыми формами (рис. 1), появление которых можно расценивать как процесс компенсации.
أرز. 1. الفأر الأبيض المصاب ببكتيريا Y. pestis subsp. بيستيس I-2638. السائل البريتوني. الخلايا البدينة المعوية. التلوين حسب رومانوفسكي - Giemsa ، SW. × 100.
في الشروط الأولى من الدراسة ، شكلت MCs غير النمطية 21.0 ± 1.8٪ من إجمالي عدد MCs ، بالمصطلحات الأخيرة ، زادت هذه الأرقام إلى 25.2 ± 2.1٪. يمتلك المساهمون الأساسيون غير النموذجيين إمكانات وظيفية ضئيلة وأصغر بكثير. يبلغ قطر الخلية 6.8-8.6 ميكرومتر ، وهو متوسط 2.3 مرة أقل (ص< 0,05), по сравнению с диаметром типичных ТК. Таких клеток значительно меньше в перитонеальной жидкости белых мышей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2359, и только в период 120-180 мин после заражения отмечаются единичные интестинальные тканевые базофилы. У животных других опытных групп атипичные ТК не выявляются.
بشكل عام ، يعكس تنشيط نظام TC إعادة الهيكلة التكيفية العامة للجسم استجابةً لإدخال مستضد. يستمر تحلل الخلايا القاعدية للأنسجة على طول مسار إفراز الخلايا الحبيبية الكاملة (الشكل 2). النشاط الوظيفي للخلايا القاعدية للنسيج في السائل البريتوني لحيوانات التجارب له طابع طور. لوحظ أعلى IDTK
في الفئران البيضاء بعد 60 دقيقة من الإصابة ببكتيريا Y. pestis subsp. pestis I-2638 - 3.9 ± 0.6 ، وهو 18.5 مرة (ص< 0,01) выше значения у интактных животных, затем показатель резко снижается, но к 180 мин исследований он вновь повышается, превышая значение в контрольной группе в 4,4 раза (р < 0,01). У селекционных клонов Y. pestis subsp. pestis И-3479 и И-3480 максимальное значение индекса дегрануляции имеет место через 90 мин от начала опыта и составляет 2,0 ± 0,3 и 1,3 ± 0,4 соответственно, при этом у белых мышей II опытной группы показатели во все сроки исследования были выше, чем у животных III опытной группы.
أرز. 2. الفأر الأبيض المصاب ببكتيريا Y. pestis subsp. بيستيس I-2638. السائل البريتوني. الخلايا البدينة. زوال الحبيبات. التلوين حسب رومانوفسكي - Giemsa ، SW. × 100.
لوحظ الطابع الأكثر وضوحا للتغيرات في الأنسجة القاعدية في الفئران البيضاء من المجموعة التجريبية IV. تقع القيمة القصوى لـ IDTC في المرحلتين الثانية والرابعة من الدراسة ، متجاوزة قيم الحيوانات السليمة بمقدار 5.8 و 7.4 مرات (p< 0,05) соответственно. У особей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2948/3, только на двух сроках исследования (60-90 мин) регистрируется увеличение дегрануляции тучных клеток в 3,6 и 2,6 раза соответственно (р < 0,05), в другие сроки данные статистически не значимы. У белых мышей V опытной группы максимальное значение ИДТК приходится на второй и последний срок исследования - 0,99 и 0,92 у. е., при в контроле отмечается 0,21 у. е.
خاتمة
وبالتالي ، فإن تطور العملية المعدية في الساعات الأولى بعد تلقيح مسبب مرض الطاعون يعتمد على ملفه البلازميد ، حيث تم الكشف عن التغيرات الأكثر وضوحًا في التركيب الخلوي الكمي والنوعي للسائل البريتوني في حيوانات التجارب عند إصابتها بالسلالات. تحتوي على pYP + pYV + pYT +.
تم الكشف عن نمط المرحلة خلال التجربة في التغيير في التركيب الكمي للخلايا البدينة في السائل البريتوني ، خاصة في الأفراد المصابين بالسلالة الخبيثة لـ Y. pestis subsp. يشير pestis I-2638 (pYP + pYV + pTP33 + pYT +) ، بالإضافة إلى وجود أشكال غير ناضجة وغير نمطية من MC ، إلى تطوير عمليات التعويض.
بشكل عام ، يعكس تنشيط نظام الخلايا البدينة إعادة الهيكلة التكيفية العامة للجسم استجابةً لإدخال مستضد.
مراجع الادب
1. أنيسيموف أ. عوامل Ypestis التي تضمن الدورة الدموية والحفاظ على مسببات الطاعون في النظم البيئية للبؤر الطبيعية. الرسالة 1 // علم الوراثة الجزيئية ، ميكروبيول. والفيروسول. - 2002. - رقم 3. - س 3-23.
أنيسيموف أ. توفر عوامل Y. pestis الدورة الدموية وتحافظ على عامل الطاعون المعدي في النظم البيئية للبؤر الطبيعية. التقرير الأول // Molekuljarnaja genetika، mikrobiol. أنا الفيروسول. - 2002. - ن 3. - ص 3 - 23. (باللغة الإنجليزية)
2. Balakhonov S.V. الكشف عن متواليات النيوكليوتيدات لجينات pla و pstl و cafl على البلازميد الخفي 33 كيلو دالتون لسلالات Yersinioppedis من بؤرة طاعون Tuva // 8th Int. سيمب. على يرسينيا. - توركو ، فنلندا ، 2002. - رقم 10. - س 352-355.
Balakhonov S.V. الكشف عن متواليات نيوكليوتيدات الجين PLA و pstl و cafl في البلازميد الخفي 33 كيلو بايت من سلالات Yersinia pestis من تركيز طاعون Tuva // 8th Int. سيمب. على يرسينيا. - توركو ، فنلندا ، 2002. - رقم 10. - ص 352-355. (باللغة الإنجليزية)
3. Vityazeva S.A.، Starovoitova T.P.، Bushkova A.V. الخلايا القاعدية الأنسجة كممثلين لمجموعة كبيرة من الخلايا في نظام APUD. - قسم. في VINITI No. 376-B2010 06/17/2010. - 18 ثانية.
Vityazeva S.A. ، Starovoytova T.P. ، Bushkova A.V. الأنسجة القاعدية كممثلين للعديد من مجموعات الخلايا في نظام APUD. - قسم. في VINITI N 376-B2010 06/17/2010. - 18 مساءً (باللغة الإنجليزية)
4. Krasnozhenov EP، Fedorov Yu.V. تأثير العملية المعدية على الخصائص الشكلية للوظائف القاعدية للنسيج // Zh. ميكروبيول. و immunol. - 1996. - رقم 1. - س 107-108.
كراسنوزينوف إي بي ، فيدوروف يو في. تأثير العملية المعدية على الخصائص الشكلية
من الأنسجة القاعدية // Zhurn. ميكروبيول. ، جبيدميول. أنا مناعة. - 1996. - ن 1. - ص 107-108. (باللغة الإنجليزية)
5. Lebedeva S.A.، Trukhachev A.L.، Ivanova V.S.، Arutyunov Yu.I. وآخرون. تقلب مسبب الطاعون ومشاكل تشخيصه / إد. م. ليبيديفا. - روستوف أون دون: أنتي ، 2009. - 533 ص.
ليبيديفا إس إيه ، تروخاتشيف إيه إل ، إيفانوفا في إس ، أروتيونوف يو. وآخرون. تنوع العوامل المعدية للطاعون ومشكلات تشخيصه / إد. بواسطة S.A. ليبيديفا. - روستوف أون دون: أنتي ، 2009. - 533 ص. (باللغة الإنجليزية)
6. مينشيكوف ف. وآخرون. طرق البحث المخبري في العيادة. - م: الطب 1987. - 365 ص.
مينشيكوف ف. وآخرون. طرق المختبر للبحث في العيادة. - موسكو: ميديسينا ، 1987. - 365 ص. (باللغة الإنجليزية)
1ملاءمة. أي صدمة جراحية على الصفاق هي عامل إجهاد ، وأحد المضاعفات المتكررة هي عملية تكوين الالتصاق. إن التغيرات الخلوية في السائل البريتوني لها تأثير معين على هذه العملية ، والتي ستسمح لنا دراستها باقتراح أساليب جديدة للتحكم فيها ليس فقط أثناء العمليات المخطط لها ، ولكن أيضًا في ظل الظروف القاسية.
الغرض من الدراسة. لدراسة التغيرات الخلوية في السائل البريتوني في ديناميات الإجهاد التشغيلي.
المواد والطرق. اشتملت الدراسة على 60 جرذًا تتراوح أعمارهم بين 3 أشهر ، وبلغ وزنها 250-300 جرام ، والتي تعرضت لإصابة جراحية قياسية. تم استخدام الحيوانات التجريبية لدراسة التركيب الخلوي للسائل البريتوني في عملية تكوين الالتصاق. للقيام بذلك ، في غضون 5 أيام قبل تطبيق الإصابة الجراحية وكل يومين لمدة 30 يومًا في فترة ما بعد الجراحة ، تم أخذ السائل البريتوني مع الفحص الخلوي اللاحق. عند أخذ السائل البريتوني ، تم تثبيت الحيوان مسبقًا في جهاز مطور وحاصل على براءة اختراع (RF براءة اختراع رقم 72405 ، مسجلة في 20.04.2008.). اشتمل أخذ عينات السائل البريتوني على الخطوات التالية: شد جدار البطن الأمامي باستخدام عناصر الجهاز المقترح ، وأخذ عينات من السائل البريتوني باستخدام جهاز البزل المطور تجويف البطن(براءة الاختراع RF رقم 89954 ، مسجلة في 02.12.09). تم طرد مادة الفحص الخلوي ، وإزالة المادة الطافية ، وعمل مسحات من التعليق الناتج. تم تلطيخ المسحات بطريقة رومانوفسكي-جيمسا ، والتي خضعت للتحليل الخلوي باستخدام الفحص المجهري الضوئي.
تمت دراسة مستوى الالتصاقات على 90 فأر. في ثلاثة (30 حيوانًا لكل منها) مجموعات موصوفة سابقًا ، تم حساب مستوى الالتصاقات في ديناميكيات الإصابة الجراحية في الأيام 10 و 20 و 30 (تميز المصطلح الأخير بوقت التكوين النهائي للالتصاقات البريتونية). لهذا الغرض ، بعد بضع البطن ، تم إجراء مراجعة لتجويف البطن ، وتم تحديد النوع المورفولوجي لكل التصاق تم اكتشافه.
تم حساب مستوى عملية الالتصاق بأعداد مطلقة باستخدام صيغة رياضية مطورة مسبقًا وحاصلة على براءة اختراع. تمت معالجة النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام الأساليب الإحصائية القياسية.
نتائج. أظهر الفحص الخلوي للسائل البريتوني في المسحات المعدة لجميع المجموعات التجريبية العناصر الخلوية التالية: خلايا الدم الحمراء ، الخلايا الليمفاوية ، الكريات البيض ، الحمضات ، الكريات البيض المجزأة ، الخلايا الوحيدة ، الخلايا المتوسطة ، الضامة والخلايا الشبيهة بالأرومة الليفية كانت أقل شيوعًا. كان للصورة الخلوية للسائل البريتوني علاقة واضحة بحجم الإصابة الجراحية والاضطرابات الوظيفية للصفاق.
تميز التركيب الخلوي للسائل البريتوني في المجموعة المصابة بإصابة جراحية قياسية بالتغييرات التالية: تمت استعادة عدد كريات الدم الحمراء بحلول اليوم العاشر بعد الإصابة الجراحية. انخفضت الكريات البيض في غضون 3-5 أيام بعد العملية مع إنشاء مستوى طبيعي متوسط من الكريات البيض لمدة 9 أيام ؛ زادت خلايا سلسلة الوحيدات الضامة فقط في الأيام 8-10 ؛ لوحظت زيادة طفيفة نسبيًا في عدد الخلايا الليمفاوية في أول 5-7 أيام بعد الجراحة.
في اليوم العاشر بعد حدوث إصابة جراحية قياسية ، كانت USP المحسوبة 0.31 ± 0.01 سم 3 ؛ - 0.36 ± 0.01 سم 3.
الاستنتاجات. يعتمد التركيب الخلوي للسائل البريتوني بشكل مباشر على حجم الإصابة الجراحية ، في حين أن استقرار جودة التركيب الخلوي للسائل البريتوني يكون مصحوبًا بتغيير في كميته في ديناميات الاستجابة التجددية للصفاق. . لا توفر استعادة الطبيعة الأصلية للمكون الخلوي للسائل البريتوني لمدة 15-23 يومًا استقرارًا في نشأة الالتصاق ، والذي يستمر حتى 30 يومًا.
رابط ببليوغرافي
مندلييفا أ. الخصائص السيتولوجية للسائل البريتوني في ديناميكيات الإجهاد التشغيلي // Uspekhi العلوم الطبيعية الحديثة. - 2011. - رقم 8. - ص 121-122 ؛URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view؟id=27712 (تاريخ الوصول: 01.02.2020). نلفت انتباهكم إلى المجلات التي تصدرها دار النشر "أكاديمية التاريخ الطبيعي".
السائل البريتونيهو سائل تزليق (ينتجه الصفاق ويمتصه) موجود في التجويف البطني. البطن هو المسافة بين أعضاء البطن (مثل المعدة والطحال والكبد و المرارة) والغشاء المبطن لجدار البطن.
السائل البريتوني عبارة عن سائل صافٍ ومعقم يتكون أساسًا من الماء وكميات صغيرة من خلايا الدم البيضاء والأجسام المضادة والإلكتروليتات والمواد الكيميائية الحيوية الأخرى. تتمثل الوظيفة الرئيسية للسائل البريتوني في تقليل الاحتكاك الناجم عن حركة أعضاء البطن.
أسباب التحليل
في الأشخاص الأصحاء ، يحتوي تجويف البطن على كمية صغيرة من السائل البريتوني. لكن بعض المشاكل يمكن أن تؤدي إلى تراكمها المفرط. يمكن أن يؤدي هذا السائل ، الذي يسمى أيضًا السائل الاستسقائي ، إلى حالة تسمى الاستسقاء. هذا هو أحد المضاعفات التي يسببها تليف الكبد.
يمكن أن تسبب بعض أنواع العدوى والكائنات الحية الدقيقة أيضًا التهاب الصفاق ، وهو التهاب يصيب الغشاء البريتوني.
في هذه الحالة ، يتم إجراء زراعة السائل البريتوني. هناك حاجة لتشخيص المشكلة وبدء العلاج.
زراعة السائل البريتوني
هذا اختبار معمل يتم فيه أخذ عينة من السائل من تجويف البطن ، ثم يتم فحصها بحثًا عن الكائنات الحية الدقيقة والبكتيريا والفطريات التي يمكن أن تسبب العدوى.
إجراء
سيتم إزالة بعض السائل البريتوني من البطن وإرساله إلى المختبر للزرع وتلطيخ الجرام. يسمى إجراء أخذ العينات.
تمرين
قبل البدء في بزل البطن ، من الضروري إفراغ المثانة.
سيتم تنظيف موقع البزل بمطهر.
التخدير (باستخدام التخدير الموضعي).
سيقومون بإدخال إبرة (أو trakar مع قنية ، حيث يمكنهم إجراء شق صغير) وإزالة عينة من السائل.
عند استخراج كمية كبيرة من السوائل ، قد يشعر المريض بدوار طفيف.
المخاطر المرتبطة بهذا الإجراء
هناك خطر ضئيل من أن تخترق الإبرة المثانة أو الأمعاء أو الأوعية الدموية. هذا يمكن أن يؤدي إلى انثقاب ونزيف أو التهاب في الأمعاء.
يعد سرطان المبيض وعنق الرحم من السرطانات الرئيسية التي تؤدي إلى الوفاة لدى النساء. مكر هذه الأمراض هو أنها في كثير من الأحيان لا تظهر بأي شكل من الأشكال أو تظهر عليها أعراض خفيفة. لهذا السبب ، يمكن أن ينمو الورم إلى حجم خطير قبل اكتشافه. يمكن أن يكون الفحص الخلوي للسائل البريتوني مفيدًا جدًا في اكتشاف الخلايا السرطانية أو التشوهات الجينية الأخرى في المبايض وعنق الرحم في مرحلة مبكرة.
هناك العديد من الأسباب لزيادة حجم السائل البريتوني. قد يكون نزيفًا ويتبع تمزقًا أو سحقًا في الكبد أو الطحال أو البنكرياس أو الكلى أو تمزق الأوعية البطنية. كما يمكن أن يصاب نتيجة تمزق الأعضاء المجوفة. نادرًا ما تحدث زيادة في حجم السائل البريتوني نتيجة لتهيج الغشاء البريتوني بسبب تمزق المرارة أو البنكرياس. يمكن أن يحدث التهاب الصفاق بسبب البول في البطن بعد تمزق المثانة أو إصابة الحالب أو الإحليل في عنق المثانة. سبب آخر لزيادة حجم السائل البريتوني هو الانفتال أو الدوران أو انحباس الأمعاء ، مما يؤدي إلى انسداد الأوعية الدموية السلبي. عادة لا يكون من الممكن تحديد طبيعة السائل البريتوني من الأشعة السينية ، على الرغم من أنه يمكن إجراء بعض التعميمات. كلما زادت كمية السوائل ، زاد احتمال حدوث ذلك بسبب الانصباب أو البول. كلما زاد تراكم السوائل ، زادت احتمالية الإصابة أو النزيف. من الضروري إجراء بزل لتحديد طبيعة السائل البريتوني.
يصعب أحيانًا تحديد السائل البريتوني في الصور الشعاعية. كل هذا يتوقف على نمط انتشاره في التجويف البطني وحجمه. إذا كانت هناك كمية كبيرة من السوائل موزعة في جميع أنحاء البطن ، فستظهر الأشعة السينية تمددًا في البطن وفقدانًا ملحوظًا للتباين داخل البطن. ومع ذلك ، قد لا يكون من الممكن تحديد السطح المصلي لحلقات الأمعاء وأعضاء البطن الأخرى مثل المثانة والكبد والطحال وجدار البطن ، ونتيجة لذلك التعرف على هذه الهياكل المرئية بشكل طبيعي. في هذه الحالة ، يكون استخدام تقنية التصوير الشعاعي الموضعي ذا قيمة قليلة ، حيث لا يمكن نقل السائل إلى مكان معين في البطن للمساعدة في تحديد مصدره.
إذا كان حجم السائل صغيرًا أو موضعيًا ، فإن التشخيص الشعاعي يكون أكثر صعوبة نظرًا لصغر حجم علم الأمراض. قد تنشأ هذه المشكلة التشخيصية عند الاشتباه في إصابة البنكرياس عندما يكون التهاب البنكرياس / التهاب الصفاق الناتج موضعيًا ، أو عندما يكون هناك إصابة موضعية في الأمعاء مع التهاب الصفاق القيحي الناتج. في مثل هذه الحالات ، قد يكون التصوير الموضعي أو دراسات الضغط مفيدة عند محاولة تحريك الهياكل البطنية العلوية بعيدًا عن موقع تراكم السائل البريتوني الموضعي (الجدول 3-4).
في المرضى الذين لا يتعافون ، من المتوقع إعادة فحص التجويف البريتوني ، حيث من المحتمل أن النزيف في تجويف البطن قد لا يكون ملحوظًا إلا بعد عدة ساعات من الإصابة ، حيث يتم استعادة حجم الدم وعودة ضغط الدم إلى طبيعته . قد لا يكون التهاب الصفاق مرئيًا أيضًا في الصور الشعاعية الأولى.
الجدول 3-4 دليل إشعاعي على زيادة حجم السائل البريتوني
زيادة الكثافة داخل التجويف البريتوني (الشكل 3-3 ، 3-4 ، 3-5 ، 3-6 ، 3-7)
عدم القدرة على تصور الكبد و / أو الطحال (الشكل 3-3 ، 3-4 ، 3-5 ، 3-6 ، 3-7)
عدم القدرة على تصور المثانة (الشكل 3-7).
فقدان سطح الأمعاء المصلي (الشكل 3-3 ، 3-5 ، 3-7)
“يطفو على السطح” الحلقات المعوية (الشكل 3-3 ، 3-6)
عدم القدرة على تصور جدار البطن (الشكل 3-7).
يتم الحصول على السائل البريتوني للبحث عن طريق البزل. يتم إجراء البزل باستخدام مبزل وقنية يتم إدخالها من خلال جدار البطن تحت تأثير التخدير الموضعي. إذا تم تفريغ السائل البريتوني لأغراض علاجية ، يتم ربط قنية المبازل بها نظام الصرف الصحي. ومع ذلك ، إذا كانت هناك حاجة إلى كمية صغيرة فقط من السائل البريتوني للفحص ، فيمكن استخدام مبزل وإبرة ثقب عيار 18. عند ثقب الأرباع الأربعة للبطن ، يتم سحب السائل البريتوني من كل ربع ، وهو أمر مهم لتشخيص الأضرار التي لحقت بأعضاء البطن في الصدمات والتدخل الجراحي في الوقت المناسب.
- يجب أن يوضح للمريض أن الدراسة تسمح لك بتوضيح سبب الاستسقاء أو تشخيص الأضرار التي لحقت بأعضاء البطن أثناء الصدمة.
- لا توجد قيود على النظام الغذائي والنظام الغذائي مطلوبة.
- يجب إخبار المريض بأنه سيتم أخذ عينة من السائل البريتوني أثناء الفحص ، وسيتم إجراء ثقب في جدار البطن تحت تأثير التخدير الموضعي ، مما سيقلل من الشعور بعدم الراحة ، وأن الفحص سيستغرق عادة حوالي 45 دقيقة.
- ولتخفيف القلق لدى المريض يجب طمأنته والتأكد من أن المضاعفات في هذه الدراسة نادرة للغاية.
- إذا كان المريض مصابًا بالاستسقاء ، فيجب إخباره أن إفراغ السائل الاستسقائي سيحسن الحالة الصحية ويسهل التنفس.
- من الضروري التأكد من أن المريض أو أقاربه يقدمون موافقة كتابية على الدراسة.
- قبل الدراسة ، يتم تحديد المعلمات الفسيولوجية الأساسية الأولية ووزن الجسم وقياس محيط البطن.
- يجب تحذير المريض أنه إذا لزم الأمر ، سيتم أخذ الدم منه للبحث.
- قبل الدراسة ، يجب على المريض التبول ، وهو أمر مهم لمنع الضرر العرضي للمثانة عن طريق ثقب إبرة أو مبزل.
- قبل الدراسة ، يتم إجراء مسح بالأشعة السينية للبطن.
- يجلس المريض على سرير أو كرسي بحيث توضع قدميه بشكل مريح على الأرض ، ويدعم ظهره بإحكام. إذا كان من الصعب على المريض الخروج من السرير ، ارفع رأس السرير عالياً (وضع فاولر العالي) واطلب من المريض الراحة.
- تتم تغطية المريض لمنع قشعريرة ، مع ترك مكان البزل مفتوحًا فقط.
- لمنع تبلل الفراش وتدفق السائل البريتوني على المريض ، يتم استخدام قماش زيتي بلاستيكي.
- يتم حلق الشعر في منطقة البزل ، ويتم معالجة الجلد بمحلول مطهر ومغطى بحفاضات معقمة.
- يتم تخدير موضع البزل بمحلول مخدر موضعي.
- يقوم الطبيب بإدخال إبرة ثقب أو مبزل بقنية على مستوى 2.5-5 سم تحت السرة ، ولكن يمكن أيضًا عمل ثقب في جدار البطن في المنطقة الحرقفية ، على حافة المستقيمة البطنية ، في الجانب الجانبي. المنطقة ، أو في كل من الأرباع الأربعة للبطن.
- عند استخدام مبزل مع قنية ، يتم إجراء شق صغير في الجلد لتسهيل إدخاله عبر جدار البطن. تغلغل الإبرة في تجويف البطن مصحوب بصوت مميز. بعد إزالة المبزل ، يتم شفط السائل البريتوني باستخدام محقنة سعة 50 مل. إذا كنت بحاجة إلى الإخلاء كمية كبيرةالسائل البريتوني ، المحقنة متصلة بأنبوب من نظام التسريب الوريدي إلى كيس بلاستيكي. لا يمكنك تفريغ أكثر من 1500 مل من السائل البريتوني. إذا كان من الصعب تصريف السائل ، فيجب إدخال مبزل به قنية أو إبرة ثقب في مكان آخر في جدار البطن.
- بعد تفريغ السائل البريتوني ، تتم إزالة القنية أو الإبرة ويتم الضغط على موقع البزل بمنديل معقم ، وأحيانًا يتم وضع خياطة واحدة على الجرح الجلدي.
- يتم ترقيم عينات السائل البريتوني بالترتيب الذي تم الحصول عليها به. إذا كان المريض يتلقى مضادات حيوية ، فيتم تدوين ذلك في نموذج الإحالة إلى المختبر.
- بعناية ، وفقًا للتعليمات الحالية ، تتم إزالة الأدوات المستخدمة ، وتعبأ المواد للاستخدام الفردي في حاوية خاصة للتدمير اللاحق.
- يتم وضع ضمادة شاش معقمة على موقع البزل. يجب أن يكون متعدد الطبقات لامتصاص السائل البريتوني المتدفق. يجب مراجعة الضمادة بشكل دوري (على سبيل المثال ، في كل اختبار للعلامات الحيوية) وتغييرها أو تأمينها حسب الضرورة.
- من الضروري تحديد المعلمات الفسيولوجية الرئيسية بشكل دوري ، إذا كانت حالة المريض غير مستقرة ، يتم تحديدها كل 15 دقيقة. يتم وزن المريض وقياس محيط البطن وبعد ذلك يتم مقارنة النتائج بالنتائج الأصلية.
- يتم توفير الراحة للمريض ، وإذا أمكن ، يمتنع عن الإجراءات الطبية وغيرها من الإجراءات التي قد تسبب له الإجهاد (على سبيل المثال ، تغيير أغطية السرير).
- مراقبة إدرار البول لمدة 24 ساعة ، يشير وجود بيلة دموية إلى تلف المثانة.
- مع تفريغ كمية كبيرة من السائل البريتوني ، يزداد خطر الانهيار ، لذلك يجب أن تكون حريصًا بشكل خاص بشأن الأعراض مثل شحوب الجلد وزيادة معدل ضربات القلب والتنفس وخفض ضغط الدم والضغط الوريدي المركزي وضعف الوعي والشكاوى من الدوخة. في مثل هذه الحالات ، إذا كان المريض واعيًا ، يتم إعطاؤه سوائل للشرب.
فيما يتعلق بالسمات المذكورة أعلاه ، من خلال إعطاء السوائل الوريدية والألبومين للمرضى ، يتم تحديد محتوى الشوارد (خاصة الصوديوم) والبروتين في المصل.
ميزات السائل البريتوني طبيعية.
| الميزات والمكونات العامة | المعنى |
| علامات عامة | سائل معقم ، صافٍ أو أصفر باهت ، عديم الرائحة ، بكمية لا تزيد عن 50 مل |
| خلايا الدم الحمراء | مفقود |
| الكريات البيض | أقل من 300 في 1 ميكرولتر |
| بروتين | 0.3-4.1 جم / ديسيلتر (SI: 3-4.1 جم / لتر) |
| الجلوكوز | 70-100 مجم / ديسيلتر (SI: 3.5-5 ملي مول / لتر) |
| الأميليز | 138-404 وحدة / لتر |
| الأمونيا | أقل من 50 مجم / ديسيلتر (النظام الدولي: أقل من 29 ميكرو مول / لتر) |
| الفوسفاتيز القلوية |
|
| الخلايا السرطانية (الفحص الخلوي) | مفقود |
| بكتيريا | مفقود |
| الفطر | مفقود |
يلاحظ السائل البريتوني العكر مع التهاب الصفاق الناجم عن عدوى بكتيرية أولية ، تمزق الأمعاء نتيجة الصدمة ، التهاب البنكرياس ، احتشاء الأمعاء ، انسداد الخنق ، التهاب الزائدة الدودية. يُلاحظ وجود سائل صفاقي دموي في الأورام الحميدة والخبيثة ، والتهاب البنكرياس النزفي ، أو تلف الأوعية الدموية عند إدخال مبزل في التجويف البطني ، يشير السائل البريتوني الأخضر ، بسبب وجود الصفراء فيه ، إلى تمزق المرارة ، والتهاب البنكرياس الحاد ، وانثقاب الأمعاء أو الاثني عشر. قرحة.
يشير التواجد في السائل البريتوني لأكثر من 100 خلية حمراء لكل 1 ميكرولتر (SI: 100-106 / لتر) إلى وجود ورم أو سل في حالة إصابة البطن مع تلف الأعضاء الداخلية ، ويتجاوز عدد كريات الدم الحمراء 100000 لكل 1 ميكرولتر (SI) : 100-109 / لتر) زيادة عدد الكريات البيض في السائل البريتوني ، أكثر من 25٪ منها عدلات ، لوحظ في 90٪ من مرضى التهاب الصفاق الجرثومي العفوي و 50٪ من مرضى تليف الكبد. نسبة عالية من الخلايا الليمفاوية هي سمة من سمات المرضى الذين يعانون من التهاب الصفاق السل أو استسقاء كيلوس. عدد كبير من الخلايا الظهارية في السائل البريتوني هو أيضا سمة من سمات التهاب الصفاق السلي. لوحظ مستوى بروتين أكثر من 3 جم / ديسيلتر (SI: 30 جم / لتر) في الأورام الخبيثة ، أكثر من 4 جم / ديسيلتر (SI: 40 جم / لتر) في مرض السل. لوحظ انخفاض مستويات الجلوكوز في السائل البريتوني في المرضى الذين يعانون من التهاب الصفاق السلي والسرطان البريتوني.
يزيد نشاط الفوسفاتيز القلوي في السائل البريتوني بأكثر من مرتين مقارنة بالنشاط الطبيعي في مصل الدم في المرضى الذين يعانون من تمزق الأمعاء وخنق انسداد الأمعاء الدقيقة. لوحظ زيادة أكثر من الضعف في مستوى الأمونيا مقارنة بالمستوى الطبيعي في مصل الدم مع تمزق الأمعاء وخنق الأمعاء الدقيقة أو الأمعاء الغليظة ، مع قرحة مثقوبة والتهاب الزائدة الدودية المثقوب. نسبة محتوى البروتين في السائل البريتوني إلى محتواه في مصل الدم ، الذي يساوي أو يزيد عن 0.5 ، وهو سمة من سمات ورم خبيث أو استسقاء السل أو البنكرياس ويشير إلى سبب خارج الكبد للاستسقاء. تشير النسبة الأقل من 0.5 إلى تليف الكبد غير المعقد. يشير التدرج بين مستوى الألبومين في السائل الاستسقائي والمصل بأكثر من 1 جم / ديسيلتر (SI: أكثر من 10 جم / لتر) إلى التهاب الكبد المزمن ، والتدرج أقل من 10 جم / لتر هو سمة من سمات الورم الخبيث. يمكن للفحص الخلوي للسائل البريتوني الكشف عن الخلايا السرطانية ، والفحص الميكروبيولوجي - الإشريكية القولونية ، اللاهوائية والمكورات المعوية التي تدخل التجويف البطني عند تمزق عضو مجوف ، والعمليات الالتهابية للأعضاء الداخلية (التهاب الزائدة الدودية ، والتهاب البنكرياس) ، والسل ، وأمراض المبيض. عادة ما يشير تحديد المكورات الموجبة الجرام إلى التهاب الصفاق الأولي. مع داء النوسجات ، داء المبيضات أو داء الكروانيديا ، توجد الفطريات في السائل البريتوني.