Uspehi sodobnega naravoslovja. Kaj je peritonealna tekočina Peritonealna tekočina

02.12.2020

UDK 579.842.23+ 616-092.19

T.P. Starovoitova, T.A. Ivanova, G.B. Mukhturgin, S.A. Vityazeva, V.I. Dubrovina,

K.M. Korytov, S.V. Balakhonov

SPREMEMBE CELIČNE SESTAVE PERITONEALNE TEKOČINE BELIH MIŠI MED INFEKTNIM PROCESOM, KI GA POVZROČI YERSINIA PESTIS Z RAZLIČNO SESTAVO PLAZMIDA

Irkutsk Raziskovalni inštitut za boj proti kugi Sibirije in Daljnega vzhoda (Irkutsk)

V članku so predstavljeni podatki o vplivu plazmidne sestave kužnega mikroba na subpopulacijsko sestavo mononuklearnih celic v peritonealni tekočini belih miši na zgodnji datumi infekcijski proces. Pokazalo se je, da je sprememba celične sestave peritonealne tekočine poskusnih živali odvisna od plazmidnega profila sevov kužnih mikrobov. Med poskusom so bile odkrite tudi faze v spremembi kvantitativne sestave mastocitov v peritonealni tekočini belih miši, okuženih s sevi Yersinia pestis z različnimi plazmidnimi spektri. Ključne besede: Yersinia pestis, peritonealna tekočina, virulenca

SPREMEMBE CELIČNIH KOMPONENT PERITONEALNE TEKOČINE BELIH MIŠI Z OKUŠBO, KI JE POVZROČILA YERSINIA PESTIS Z RAZLIČNIM PLAZMIDNIM PROFILOM

T.P. Starovoytova, T.A. Ivanova, G.B. Mukhturgin, S.A. Vityazeva, V.I. Dubrovina,

K.M. Korytov, S.V. Balakhonov

Irkutsk Antiplague Research Institute of Sibirija in Daljni vzhod, Irkutsk

V članku so predstavljeni podatki o vplivu plazmidnega profila Yersinia pestis na subpopulacijsko strukturo mononuklearnih celic peritonealne tekočine miši v zgodnjih fazah infekcijskega procesa. Pokazalo se je, da je sprememba celične sestave peritonealne tekočine poskusnih živali odvisna od plazmidnega profila sevov Yersinia pestis. Ugotavljali smo fazni značaj v spremembah kvantitativne sestave mastocitov peritonealne tekočine belih miši, okuženih s sevi Y. pestis z različnimi plazmidnimi spektri. Ključne besede: Yersinia pestis, peritonealna tekočina, virulenca

Velika večina dejavnikov virulence Yersinia pestis je povezana s sestavo plazmidov. Genom povzročitelja kuge glavne podvrste - Yersinia pestis subspecies pestis - ima tri plazmide - pYY(45MDa), pYP(6MN) in pYT(61MDa), njihova vloga pri izvajanju patogenih lastnosti Yersinia je dobra. študiral. S prisotnostjo plazmida pYV imajo sevi Yersinia številne fenotipske značilnosti: celična adhezija, avtoaglutinacija, površinska aglutinacija, pa tudi sinteza proteinov zunanje membrane, vključno z V- in W-antigeni in drugimi proteini, katerih delovanje je namenjen zatiranju fagocitne aktivnosti celic. imunski sistem. Plazmida pYP in pYT sta vidospecifična. Plazmid pYP določa sintezo bakteriocina pesticina 1 in aktivatorja plazminogena, plazmid pYT pa kodira dva najbolj dobro raziskana dejavnika virulence – mišji toksin in kapsulo F1. Posebnost patogena, ki kroži v žarišču Tuva, je prisotnost v njegovem genomu dodatnega četrtega plazmida pTR33 s še vedno nejasnimi funkcijami. Ta plazmid naj bi bil gensko spremenjen 9,5 kD rezidenčni plazmid, ki nosi gena pla (aktivator plazminogena) in pstl (pesticin 1). Izguba plazmida vodi do spremembe biokemičnih, kulturnih lastnosti, pa tudi do zmanjšanja ali popolne izgube virulence patogena.

Vodilni klinični znak okužbe s kugo in zastrupitve, ki določa resnost poteka

in izid bolezni je kršitev homeostaze makroorganizma. Primarne tarče endotoksina so polimorfonuklearni levkociti, makrofagi, monociti, endotelijske celice in drugi celični elementi. Spremembe v celični sestavi peritonealne tekočine lahko štejemo za diagnostično merilo resnosti bolezni pri številnih boleznih, vključno s kugo. V zvezi s tem je zelo zanimiva ocena kvantitativne in kvalitativne celične sestave peritonealne tekočine pri belih miših z infekcijskim procesom, ki ga povzroča Y. pestis z različno plazmidno sestavo.

Namen dela: preučiti dinamiko sprememb subpopulacijske sestave mononuklearnih celic v peritonealni tekočini belih miši v zgodnjih fazah eksperimentalne okužbe s kugo.

MATERIALI IN METODE

Eksperimentalni model v poskusih je bilo 175 brezkrmnih, vendar standardnih glede na pogoje zadrževanja in mase (18-20 g) belih miši obeh spolov. Živali so bile umaknjene iz poskusa v skladu s "Pravili laboratorijske prakse v Ruska federacija«, odobren z Odredbo Ministrstva za zdravje Ruske federacije št. 267 z dne 19. junija 2003 in nacionalnim standardom Ruske federacije GOST R 53434-2009 »Načela dobre laboratorijske prakse«.

Uporabili smo 6 sevov Y. pestis subsp. pestis in Y. pestis subsp. altaika iz zbirke Ir-

Tabela 1

Značilnosti testiranih sevov kugnega mikroba

Sev Kraj izolacije Sestava plazmida Virulenca za bele miši (RbO), m.c.

Y. pestis subsp. pestis I-2638 Tuva naravno žarišče kuge pYP+pYV+pTP33+pYT+ 10 / zelo virulentno

Y. pestis subsp. pestis I-3479 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP+pYV-pTP33+pYT+ avirulent

Y. pestis subsp. pestis I-3480 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP-pYV-pTP33+pYT+ avirulent

Y. pestis subsp. altaica I-2359 Gorno-Altai naravno žarišče kuge pYP+pYV+pYT+ 4 x 104/šibko virulentno

Y. pestis subsp. altaica I-2948 Gorno-Altai naravno žarišče kuge pYP-pYV+pYT+ 3 x 108/preostala virulenca

Y. pestis subsp. altaica I-2948/3 Irkutsk Anti-Plague Institute pYP-pYV-pYT+ avirulent

Kutski raziskovalni inštitut proti kugi Rospotrebnadzorja (tabela 1).

Neokrnjene bele miši smo razdelili v 6 eksperimentalnih in 1 kontrolno skupino po 25 miši. Živali poskusnih skupin smo z intraperitonealno metodo okužili z Y. pestis v koncentraciji 1 x 106 mc v volumnu 0,5 ml. Prvi poskusni skupini živali smo injicirali dvodnevno kulturo Y. pestis subsp., ki je bila gojena pri temperaturi 28 °C. pestis I-2638, skupina II - Y. pestis subsp. pestis I-3479, skupina III - Y. pestis subsp. pestis I-3480, IV poskusna skupina živali je bila okužena z referenčnim gornoaltajskim sevom Y pestis subsp. altaica I-2359, skupina V - Y. pestis subsp. altaica I-2948, skupina VI - s selekcijskim sevom Y. pestis subsp. altaika I-2948/3.

Vzorčenje materiala iz poskusnih živali (peritonealna tekočina) je bilo opravljeno po 30, 60, 90, 120 in 180 minutah. Skupno število jedrskih celic v 1 ml peritonealne tekočine smo prešteli v fiksnih pripravkih, obarvanih s standardnimi metodami. Za bakteriološko analizo smo inokulirali kri iz srca in peritonealne tekočine (po 0,1 ml) na trden hranilni medij (Hottinger agar, pH 7,2).

Pri delu so bile uporabljene metode anketne mikroskopije. Kvantitativna ocena skupnega števila levkocitov je bila izvedena z uporabo enotne metode za štetje celic v komori Goryaev. Odstotek različne vrste levkocitov smo izvedli z metodo morfološkega pregleda peritonealne tekočine v razmazih. Pri študiji zdravil z uporabo računalniškega programa "MoticImagesPlus" (verzija 2) je bilo opravljeno diferencirano število tkivnih bazofilcev (TC), izmerjen njihov premer in površina. Stopnjo aktivacije MC smo ocenjevali z indeksom celične degranulacije (IDTC) – odstotkom degranuliranih mastofilnih bazofilcev glede na njihovo skupno število.

Avtomatska analiza slike je bila izvedena z uporabo svetlobnega mikroskopa Zeiss (Nemčija) z video kamero Moticam 2000, ločljivost 1392 x 1040 slikovnih pik, pribl. 10, letn. sto.

Pomen rezultatov študije je bil pridobljen z uporabo matematičnih metod statistične obdelave primerjalna analiza s Studentovim t-testom in z uporabo računalniškega programa Statistica, različica 6.0 (StatSoft Inc. 19842001, IPHI 31415926535897) in programskega paketa

Microsoft Office Excel (2003). Rezultati so bili ocenjeni kot pomembni glede na kontrolo na str< 0,05.

REZULTATI IN RAZPRAVA

Skupno število celic v peritonealni tekočini pri intaktnih živalih je 4,3 ± 0,9 x 103 v 1 cm3, medtem ko so makrofagi prevladujoči tip celic in predstavljajo 60,5 ± 5,6 % od skupnih 17,0 ± 2,8 %; 5,5 ± 0,8 % so mezotelijske celice in drugi celični elementi.

Pri okuženih belih miših opazimo faznost v spremembi skupnega števila jedrskih celic. Pri živalih, okuženih z virulentnim sevom Y. pestis subsp. pestis I-2638 se po 30 minutah skupno število jedrskih celic močno poveča na 1,5 ± 0,4 x 104 v 1 cm3, kar je 3,4-krat več kot pri intaktnih živalih. Do 60 minut študije se kazalniki zmanjšajo na nedotaknjene vrednosti, ki se še naprej zmanjšujejo v naslednjih obdobjih. Citološka slika peritonealne tekočine je jasno povezana z okuženo kulturo. Pri živalih iz skupine I je bilo 30 minut po okužbi opaženo povečanje števila limfocitov, ki je preseglo vrednost pri intaktnih živalih za 4-krat zaradi močnega zmanjšanja števila monocitov. Te spremembe so bile zaznane v vseh obdobjih opazovanja. V peritonealni tekočini belih miši, okuženih z Y. pestis subsp. pestis I-2638 je bilo po 120 minutah od začetka poskusa zabeleženo povečanje števila segmentiranih nevtrofilcev za 2,5-krat v primerjavi s kontrolo (p< 0,05), и незначительное увеличение количества палочкоядерных нейтрофилов. На последнем сроке исследования в мазках перитонеальной жидкости выявляется большое количество фибробластов, агрегация лимфоцитов и большое количество делящихся клеток.

Bele miši, okužene z Y. pestis subsp. altaica I-2359, Y. pestis subsp. pestis I-3479 in Y. pestis subsp. altaica I-2948/3, 30 min po začetku poskusa ni bilo statistično pomembnih sprememb. Po 180 min število jedrskih celic v peritonealnem eksudatu preseže kontrolne vrednosti za 2,8 (p< 0,01), 1,9 (р < 0,05) и 1,5 раза соответственно. При введении животным Y. pestis subsp. pestis И-3480 и Y. pestis subsp. altaica И-2948 через 30 мин отмечается повышение общего числа ядерных клеток с последующим снижением (120 мин) до уровня контроля, и к 180 мин показатель вновь увеличивается.

Pri pregledu brisa peritonealne tekočine pri živalih vseh poskusnih skupin beležimo celično proliferacijo limfocitov, histiocitov, povečanje eozinofilcev, tkivnih bazofilcev, plazemskih celic, mezotelijskih celic in fibroblastov.

Vrednotenje morfoloških lastnosti bazofilcev, njihovega števila in funkcionalne aktivnosti je zanimivo za preučevanje celične sestave peritonealne tekočine okuženih živali.

Ugotovljeno je bilo, da pri poskusnih belih miših pride do faze v spremembi kvantitativne sestave tkivnih bazofilcev peritonealne tekočine. Povečanje njihovega števila pri živalih, okuženih z Y. pestis subsp. pestis I-2638, je registriran 60 minut po vnosu kulture in preseže vrednosti pri intaktnih živalih za 2,6-krat (p< 0,05). Затем данные показатели снижаются (90-120 мин) до значений ин-тактных животных, к 180 мин вновь возрастают, достигая значений 8,5 против 2,5 в контроле (р < 0,05). Часть ТК представлены интестинальными - незрелыми формами (рис. 1), появление которых можно расценивать как процесс компенсации.

riž. 1. Bela miška, okužena z Y. pestis subsp. pestis I-2638. peritonealna tekočina. črevesnih mastocitov. Barvanje po Romanovskem - Giemsa, SW. x 100.

V prvih terminih študije so atipične MC predstavljale 21,0 ± 1,8 % celotnega števila MC, v zadnjih terminih so se te številke povečale na 25,2 ± 2,1 %. Atipični TC imajo minimalen funkcionalni potencial in so veliko manjši. Premer celice je 6,8-8,6 μm, kar je v povprečju 2,3-krat manj (p< 0,05), по сравнению с диаметром типичных ТК. Таких клеток значительно меньше в перитонеальной жидкости белых мышей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2359, и только в период 120-180 мин после заражения отмечаются единичные интестинальные тканевые базофилы. У животных других опытных групп атипичные ТК не выявляются.

Na splošno aktivacija sistema TC odraža splošno prilagodljivo prestrukturiranje telesa kot odgovor na uvedbo antigena. Degranulacija tkivnih bazofilcev poteka po poti celozrnate eksocitoze (slika 2). Funkcionalna aktivnost tkivnih bazofilcev v peritonealni tekočini poskusnih živali ima fazni značaj. Opažen je najvišji IDTK

pri belih miših 60 minut po okužbi z Y. pestis subsp. pestis I-2638 - 3,9 ± 0,6, kar je 18,5-krat (p< 0,01) выше значения у интактных животных, затем показатель резко снижается, но к 180 мин исследований он вновь повышается, превышая значение в контрольной группе в 4,4 раза (р < 0,01). У селекционных клонов Y. pestis subsp. pestis И-3479 и И-3480 максимальное значение индекса дегрануляции имеет место через 90 мин от начала опыта и составляет 2,0 ± 0,3 и 1,3 ± 0,4 соответственно, при этом у белых мышей II опытной группы показатели во все сроки исследования были выше, чем у животных III опытной группы.

riž. 2. Bela miška, okužena z Y. pestis subsp. pestis I-2638. peritonealna tekočina. Mastociti. Degranulacija. Barvanje po Romanovskem - Giemsa, SW. x 100.

Najbolj izrazit fazni značaj sprememb tkivnih bazofilov je opažen pri belih miših IV poskusne skupine. Največja vrednost IDTC pade na drugi in četrti stopnji študije in presega vrednosti nedotaknjenih živali za 5,8 in 7,4-krat (p< 0,05) соответственно. У особей, зараженных Y. pestis subsp. altaica И-2948/3, только на двух сроках исследования (60-90 мин) регистрируется увеличение дегрануляции тучных клеток в 3,6 и 2,6 раза соответственно (р < 0,05), в другие сроки данные статистически не значимы. У белых мышей V опытной группы максимальное значение ИДТК приходится на второй и последний срок исследования - 0,99 и 0,92 у. е., при в контроле отмечается 0,21 у. е.

ZAKLJUČEK

Tako je razvoj infekcijskega procesa v prvih urah po inokulaciji povzročitelja kuge odvisen od njegovega plazmidnega profila, saj so bile pri poskusnih živalih pri okužbi s sevi odkrite najbolj izrazite spremembe v kvantitativni in kvalitativni celični sestavi peritonealne tekočine. ki vsebuje pYP+pYV+pYT+.

Fazni vzorec, razkrit med poskusom v spremembi kvantitativne sestave mastocitov v peritonealni tekočini, zlasti pri posameznikih, okuženih z virulentnim sevom Y. pestis subsp. pestis I-2638 (pYP+pYV+pTP33+pYT+), pa tudi prisotnost nezrelih in atipičnih oblik MC kaže na razvoj kompenzacijskih procesov.

Na splošno aktivacija sistema mastocitov odraža splošno prilagodljivo prestrukturiranje telesa kot odgovor na uvedbo antigena.

LITERATURA

1. Anisimov A.N. Ypestis dejavniki, ki zagotavljajo kroženje in ohranjanje povzročitelja kuge v ekosistemih naravnih žarišč. Sporočilo 1 // Molekularna genetika, Microbiol. in virusol. - 2002. - Št. 3. - S. 3-23.

Anisimov A.N. Dejavniki Y. pestis, ki zagotavljajo kroženje in ohranjanje povzročitelja kuge v ekosistemih naravnih žarišč. Poročilo I // Molekularnaja genetika, mikrobiol. jaz virusol. - 2002. - Št. 3. - Str. 3-23. (v angleščini)

2. Balakhonov S.V. Detekcija nukleotidnih zaporedij genov pla, pstl in cafl na 33 kd kriptičnem plazmidu sevov Yersiniapestis iz žarišča kuge Tuva // 8th Int. Symp. na Yersinia. - Turku, Finska, 2002. - Št. 10. - S. 352-355.

Balakhonov S.V. Detekcija nukleotidnih zaporedij gena pla, pstl in cafl v sevih kriptičnega plazmida 33 kb Yersinia pestis iz žarišča kuge Tuva // 8th Int. Symp. na Yersinia. - Turku, Finska, 2002. - N 10. - P. 352-355. (v angleščini)

3. Vityazeva S.A., Starovoitova T.P., Bushkova A.V. Tkivni bazofilci kot predstavniki velike celične populacije sistema APUD. - Dep. v VINITI št.376-B2010 17.06.2010. - 18 s.

Vityazeva S.A., Starovoytova T.P., Bushkova A.V. Tkivni bazofili kot predstavniki številnih celičnih populacij sistema APUD. - Dep. v VINITI N 376-B2010 17.06.2010. - 18.00 (v angleščini)

4. Krasnoženov E.P., Fedorov Yu.V. Vpliv infekcijskega procesa na morfofunkcionalne značilnosti tkivnih bazofilcev // Zh. mikrobiol., epidemiol. in imunol. - 1996. - Št. 1. - S. 107-108.

Krasnoženov E.P., Fedorov Yu.V. Vpliv infekcijskega procesa na morfofunkcionalne značilnosti

tkivnih bazofilov // Zhurn. mikrobiol., jepidemiol. imunol. - 1996. - N 1. - Str. 107-108. (v angleščini)

5. Lebedeva S.A., Trukhachev A.L., Ivanova V.S., Arutyunov Yu.I. in drugi Variabilnost povzročitelja kuge in problemi njegove diagnoze / Ed. S.A. Lebedeva. - Rostov na Donu: Antey, 2009. - 533 str.

Lebedeva S.A., Trukhachev A.L., Ivanova V.S., Arutjunov Yu.I. et al. Raznolikost povzročitelja kuge in problemi njegove diagnostike / Ed. avtorja S.A. Lebedeva. - Rostov na Donu: Antei, 2009. - 533 str. (v angleščini)

6. Menshikov V.V. et al Laboratorijske raziskovalne metode v kliniki. - M.: Medicina, 1987. - 365 str.

Menshikov V.V. et al. Laboratorijske metode raziskav v kliniki. - Moskva: Medicina, 1987. - 365 str. (v angleščini)

Relevantnost. Vsaka kirurška travma na peritoneju je stresni dejavnik, eden od pogostih zapletov pa je proces nastanka adhezije. Na ta proces imajo določen vpliv citološke spremembe v peritonealni tekočini, katerih študija nam bo omogočila predlaganje novih pristopov k njeni obvladljivosti ne le med načrtovanimi operacijami, temveč tudi v ekstremnih pogojih.

Namen študije. Preučiti citološke spremembe v peritonealni tekočini v dinamiki operativnega stresa.

Material in metode. V študiji je sodelovalo 60 podgan, starih 3 mesece, ki so dosegle težo 250-300 g, ki so bile podvržene standardni kirurški poškodbi. Poskusne živali smo uporabili za preučevanje celične sestave peritonealne tekočine v procesu adheziogeneze. V ta namen smo 5 dni pred nanosom kirurške poškodbe in vsak drugi dan 30 dni v pooperativnem obdobju odvzeli peritonealno tekočino z naknadno citološko preiskavo. Pri jemanju peritonealne tekočine je bila žival predhodno fiksirana v razviti in patentirani napravi (RF Patent št. 72405, registriran 20.04.2008). Vzorčenje peritonealne tekočine je vključevalo naslednje korake: laparolifting sprednje trebušne stene z elementi predlagane naprave, vzorčenje peritonealne tekočine z razvito punkcijsko napravo trebušna votlina(Patent RF št. 89954, registriran 02.12.09). Material za citološko preiskavo smo centrifugirali, supernatant odstranili in iz nastale suspenzije naredili brise. Brise smo obarvali po metodi Romanovsky-Giemsa, podvrženi citološki analizi s svetlobno mikroskopijo.

Stopnjo adhezij so preučevali na 90 podganah. V treh (vsaka po 30 živali) predhodno opisanih skupinah je bila stopnja adhezij izračunana v dinamiki kirurške poškodbe 10., 20. in 30. dan (zadnji izraz je označeval čas dokončnega nastanka peritonealnih adhezij). V ta namen je bila po relaparotomiji opravljena revizija trebušne votline in določen morfološki tip vsake zaznane adhezije.

Izračun stopnje lepilnega procesa je bil izveden v absolutnih številkah z uporabo predhodno razvite in patentirane matematične formule. Dobljene rezultate smo obdelali s standardnimi statističnimi metodami.

Rezultati. Pri citološki preiskavi peritonealne tekočine v pripravljenih brisih vseh poskusnih skupin so bili odkriti naslednji celični elementi: redkeje so bili eritrociti, limfociti, levkociti, eozinofili, segmentirani levkociti, monociti, mezotelij, makrofagi in fibroblastom podobne celice. Citološka slika peritonealne tekočine je imela jasno povezavo z volumnom kirurške poškodbe in funkcionalnimi motnjami peritoneja.

Za celično sestavo peritonealne tekočine v skupini s standardno kirurško poškodbo so bile značilne naslednje spremembe: število eritrocitov se je obnovilo do 10. dne po kirurški poškodbi. Levkociti so se zmanjšali v 3-5 dneh po operaciji z vzpostavitvijo povprečne normalne ravni levkocitov za 9 dni; celice serije monocitov-makrofagov so se povečale šele 8-10 dni; v prvih 5-7 dneh po operaciji so opazili relativno majhno povečanje števila limfocitov.

10. dan po nastanku standardne kirurške poškodbe je bila izračunana USP 0,31 ± 0,01 cm3; - 0,36 ± 0,01 cm3.

Zaključki. Celična sestava peritonealne tekočine je neposredno odvisna od volumna kirurške poškodbe, medtem ko stabilnost kakovosti celične sestave peritonealne tekočine spremlja sprememba njene količine v dinamiki regenerativnega odziva peritoneja. . Obnova prvotne narave citološke komponente peritonealne tekočine za 15-23 dni ne zagotavlja stabilizacije adhezijske geneze, ki traja do 30 dni.

Bibliografska povezava

Mendalieva A.S. CITOLOŠKE ZNAČILNOSTI PERITONEALNE TEKOČINE V DINAMIKI OPERATIVNEGA STRESA // Uspehi moderno naravoslovje. - 2011. - Št. 8. - Str. 121-122;
URL: http://natural-sciences.ru/ru/article/view?id=27712 (datum dostopa: 01.02.2020). Predstavljamo vam revije, ki jih izdaja založba "Academy of Natural History"

peritonealna tekočina je mazalna tekočina (ki jo proizvaja in absorbira peritoneum), ki jo najdemo v trebušni votlini. Trebuh je prostor med trebušnimi organi (kot so želodec, vranica, jetra in žolčnika) in membrano, ki obdaja trebušno steno.

Peritonealna tekočina je bistra, sterilna tekočina, sestavljena predvsem iz vode in majhnih količin belih krvnih celic, protiteles, elektrolitov in drugih biokemičnih snovi. Glavna funkcija peritonealne tekočine je zmanjšati trenje, ki ga povzroča gibanje trebušnih organov.

Razlogi za analizo

Pri zdravih ljudeh trebušna votlina vsebuje majhno količino peritonealne tekočine. Toda nekatere težave lahko privedejo do njegovega prekomernega kopičenja. Ta tekočina, imenovana tudi ascitna tekočina, lahko povzroči stanje, imenovano ascites. To je eden od zapletov, ki jih povzroča ciroza.

Nekatere okužbe in mikroorganizmi lahko povzročijo tudi peritonitis, vnetje peritonealne membrane.

V tem primeru se opravi kultura peritonealne tekočine. Potreben je za diagnosticiranje težave in začetek zdravljenja.

Kultura peritonealne tekočine

To je laboratorijski test, pri katerem se iz trebušne votline odvzame vzorec tekočine, ki se nato pregleda za mikroorganizme, bakterije in glivice, ki lahko povzročijo okužbo.

Postopek

Nekaj peritonealne tekočine bo odvzeto iz trebuha in poslano v laboratorij za kulturo in barvanje po gramu. Postopek vzorčenja se imenuje .

Usposabljanje

Pred začetkom laparocenteze je potrebno izprazniti mehur.

Mesto vboda se očisti z antiseptikom.

Anestezirati (z uporabo lokalne anestezije).

Vstavili bodo iglo (ali trakar s kanulo, za katero lahko naredijo majhen rez) in odstranili vzorec tekočine.

Pri ekstrakciji velike količine tekočine se lahko bolnik počuti rahlo omotično.

Tveganja, povezana s postopkom

Obstaja majhno tveganje, da bo igla prebodla mehur, črevesje ali krvno žilo. To lahko privede do perforacije in krvavitve ali okužbe črevesja.

Rak jajčnikov in materničnega vratu sta vodilni raki, ki vodijo do smrti žensk. Zahrbtnost teh bolezni je v tem, da se pogosto na noben način ne manifestirajo ali imajo blage simptome. Zaradi tega lahko tumor zraste do resne velikosti, preden ga odkrijejo. Citološki pregled peritonealne tekočine je lahko zelo koristen pri odkrivanju rakavih celic ali drugih genetskih nepravilnosti jajčnikov in materničnega vratu v zgodnji fazi.

Obstaja veliko razlogov za povečanje volumna peritonealne tekočine. Lahko je hemoragična in sledi rupturi ali drobljenju jeter, vranice, trebušne slinavke ali ledvic ali popu trebušnih žil. Okuži se lahko tudi kot posledica rupture votlih organov. Redko pride do povečanja volumna peritonealne tekočine kot posledica draženja peritoneja zaradi rupture žolčnika ali trebušne slinavke. Peritonitis lahko povzroči urin v trebuhu po rupturi mehurja ali poškodbi sečevodov ali sečnice na vratu mehurja. Drug vzrok povečanega volumna peritonealne tekočine je volvulus, rotacija ali ukleščenost črevesja, kar vodi do pasivne žilne okluzije. Narave peritonealne tekočine običajno ni mogoče določiti z rentgenskim slikanjem, čeprav je mogoče narediti nekatere posplošitve. Večja kot je količina tekočine, večja je verjetnost, da je posledica izliva ali urina. Bolj kot je lokalizirano kopičenje tekočine, večja je verjetnost, da je okužena ali hemoragična. Za določitev narave peritonealne tekočine je treba opraviti paracentezo.

Včasih je na rentgenskih posnetkih težko prepoznati peritonealno tekočino. Vse je odvisno od vzorca njegove porazdelitve v trebušni votlini in njene prostornine. Če je po trebuhu porazdeljena velika količina tekočine, bo rentgenski posnetek pokazal razširitev trebuha in izrazito izgubo intraabdominalnega kontrasta. Vendar pa morda ne bo mogoče identificirati serozne površine črevesnih zank in drugih trebušnih organov, kot so mehur, jetra, vranica in trebušna stena, ter posledično prepoznati te običajno vidne strukture. V tem primeru je uporaba pozicijske radiografske tehnike malo vredna, saj tekočine ni mogoče premakniti na določeno mesto v trebuhu, da bi pomagali ugotoviti njen izvor.

Če je volumen tekočine majhen ali lokaliziran, je radiografska diagnoza zaradi manjše velikosti patologije še težja. Ta diagnostična težava se lahko pojavi, če obstaja sum na poškodbo trebušne slinavke, ko je nastali pankreatitis/peritonitis lokaliziran, ali če je lokalizirana poškodba črevesja s posledičnim gnojnim peritonitisom. V takih primerih je lahko pozicijsko slikanje ali študije stiskanja v pomoč pri poskusu premikanja zgornjih trebušnih struktur stran od mesta lokaliziranega kopičenja peritonealne tekočine (tabela 3-4).

Pri bolnikih, ki ne okrevajo, je pričakovati ponovni pregled trebušne votline, saj je možno, da krvavitev v trebušni votlini ne bo opazna šele nekaj ur po poškodbi, ko se obnovi volumen krvi in se krvni tlak normalizira. . Peritonitis morda tudi ne bo viden na prvih rentgenskih posnetkih.

Tabela 3-4 Radiografski dokaz povečanega volumna peritonealne tekočine

povečana gostota v peritonealni votlini (sl. 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, 3-7)

nezmožnost vizualizacije jeter in/ali vranice (sl. 3-3, 3-4, 3-5, 3-6, 3-7)

nezmožnost vizualizacije mehurja (slika 3-7).

izguba serozne površine črevesja (sl. 3-3, 3-5, 3-7)

“plavajoče” črevesne zanke (sl. 3-3, 3-6)

nezmožnost vizualizacije trebušne stene (slika 3-7).

Peritonealno tekočino za raziskave pridobimo s paracentezo. Paracenteza se izvaja s trokarjem in kanilo, ki ju v lokalni anesteziji vstavimo skozi trebušno steno. Če se peritonealna tekočina evakuira v terapevtske namene, je trokar kanila pritrjena na drenažni sistem. Če pa je za pregled potrebna le majhna količina peritonealne tekočine, lahko uporabimo tako trokar kot punkcijsko iglo 18. Pri punkciji vseh štirih kvadrantov trebuha se iz vsakega kvadranta aspirira peritonealna tekočina, kar je pomembno za diagnosticiranje poškodb trebušnih organov pri travmi in pravočasni kirurški poseg.

Pacientu je treba razložiti, da vam študija omogoča pojasnitev vzroka ascitesa ali diagnosticiranje poškodb trebušnih organov med travmo.
Omejitve glede prehrane in prehrane niso potrebne.
Pacienta je treba obvestiti, da bo med pregledom odvzet vzorec peritonealne tekočine, v lokalni anesteziji bo opravljena punkcija trebušne stene, ki bo zmanjšala nelagodje, in da preiskava običajno traja približno 45 minut.
Za lajšanje tesnobe pri bolniku ga je treba pomiriti in zagotoviti, da so zapleti v tej študiji zelo redki.
Če ima bolnik ascites, mu je treba povedati, da bo evakuacija ascitične tekočine izboljšala počutje in olajšala dihanje.
Zagotoviti je treba, da pacient ali njegovi sorodniki dajo pisno soglasje za študijo.
Pred študijo določimo začetne osnovne fiziološke parametre, telesno težo in izmerimo obseg trebuha.
Pacienta je treba opozoriti, da mu bodo po potrebi odvzeli kri za raziskavo.
Pred študijo mora bolnik urinirati, kar je pomembno za preprečitev nenamerne poškodbe mehurja s punkcijsko iglo ali trokarjem.
Pred študijo se opravi tudi pregledni rentgenski pregled trebuha.

Pacient sedi na postelji ali na stolu, tako da so njegove noge udobno nameščene na tleh, hrbet pa je varno podprt. Če je bolniku težko vstati iz postelje, dvignite vzglavje postelje visoko (Fowlerjev visok položaj) in prosite bolnika, naj se udobno namesti.
Pacienta pokrijemo, da preprečimo mrzlico, odprto pa pustimo le mesto vboda.
Da preprečimo mokrenje posteljnine in odtekanje peritonealne tekočine na pacienta, se uporablja plastična oljna krpa.
Dlake v predelu punkcije se obrijejo, koža obdela z razkužilno raztopino in pokrije s sterilnimi plenicami.
Mesto vboda je anestezirano z raztopino lokalnega anestetika.
Zdravnik vstavi punkcijsko iglo ali trokar s kanilo na višini 2,5-5 cm pod popkom, vendar lahko punkcijo trebušne stene opravimo tudi v iliakalni regiji, na robu rektusa abdominisa, v stranskem delu. regiji ali v vsakem od štirih kvadrantov trebuha.
Pri uporabi trokarja s kanilo se naredi majhen rez na koži, da se olajša njihov vnos skozi trebušno steno. Vdor igle v trebušno votlino spremlja značilen zvok. Po odstranitvi trokarja se peritonealna tekočina aspirira s 50 ml brizge. Če se morate evakuirati velika količina peritonealne tekočine, je brizga povezana s cevjo iz sistema za intravensko infuzijo v plastično vrečko. Izpraznite lahko največ 1500 ml peritonealne tekočine. Če je tekočina težko odtečna, je treba trokar s kanilo ali punkcijsko iglo vstaviti drugje v trebušno steno.
Po evakuaciji peritonealne tekočine odstranimo kanilo ali iglo in mesto vboda pritisnemo s sterilnim prtičkom, včasih se na kožno rano nanese en šiv.
Vzorci peritonealne tekočine so oštevilčeni po vrstnem redu, v katerem so bili pridobljeni. Če bolnik prejema antibiotike, je to zapisano na obrazcu za napotnico za laboratorij.
Previdno, v skladu z obstoječimi navodili, uporabljeno orodje odstranimo, material za enkratno uporabo pa zapakiramo v posebno posodo za naknadno uničenje.
Na mesto vboda se nanese sterilni gazni povoj. Biti mora večplasten, da absorbira iztekajočo peritonealno tekočino. Obvezo je treba redno pregledovati (na primer pri vsakem testu vitalnih znakov) in jo po potrebi spremeniti ali pritrditi.
Občasno je treba določiti glavne fiziološke parametre, če je bolnikovo stanje nestabilno, se določijo vsakih 15 minut. Pacienta stehtamo in izmerimo obseg trebuha, nato pa rezultate primerjamo s prvotnimi.
Pacientu je zagotovljen mir in se po možnosti vzdrži zdravstvenih in drugih posegov, ki bi mu lahko povzročili stres (na primer menjava posteljnine).
Spremljajte diurezo 24 ur, prisotnost hematurije kaže na poškodbo mehurja.
Z evakuacijo znatne količine peritonealne tekočine se poveča tveganje za kolaps, zato morate biti še posebej previdni pri simptomih, kot so bledica kože, povečan srčni utrip in dihanje, znižanje krvnega tlaka in centralnega venskega tlaka, oslabljena zavest, pritožbe. vrtoglavice. V takih primerih, če je bolnik pri zavesti, mu damo piti tekočino.

V povezavi z zgoraj navedenimi značilnostmi se z intravenskim dajanjem tekočin in albumina bolnikom ugotavlja vsebnost elektrolitov (zlasti natrija) in beljakovin v serumu.

Značilnosti peritonealne tekočine so normalne.

Splošne značilnosti in komponente	Pomen
Splošni znaki	Sterilna, bistra ali bledo rumena tekočina, brez vonja, v količini, ki ne presega 50 ml
rdeče krvne celice	Manjka
levkociti	Manj kot 300 v 1 µl
Beljakovine	0,3-4,1 g/dl (SI: 3-4,1 g/l)
glukoze	70-100 mg/dl (SI: 3,5-5 mmol/l)
Amilaza	138-404 U/l
amoniak	Manj kot 50 mg/dL (SI: manj kot 29 µmol/L)
Alkalna fosfataza	Moški nad 18 let: 90-239 U/L Ženske, mlajše od 45 let: 76-196 U/l Ženske nad 45 let: 87-250 ie/l
Tumorske celice (citološki pregled)	Manjka
bakterije	Manjka
Gobe	Manjka

Motna peritonealna tekočina opazimo pri peritonitisu, ki ga povzroča primarna bakterijska okužba, ruptura črevesja kot posledica travme, pankreatitis, črevesni infarkt, obstrukcija zadavljenja, apendicitis. Krvavo peritonealno tekočino opazimo pri benignih in malignih tumorjih, hemoragičnem pankreatitisu ali poškodbi posode, ko v trebušno votlino vstavimo trokar. Zelenkasta peritonealna tekočina zaradi prisotnosti žolča v njej kaže na rupturo žolčnika, akutni pankreatitis, črevesno perforacijo. razjeda.

Prisotnost v peritonealni tekočini več kot 100 eritrocitov na 1 μl (SI: 100-106 / l) kaže na tumor ali tuberkulozo v primeru travme trebuha s poškodbami notranjih organov, število eritrocitov presega 100.000 na 1 μl (SI : 100-109 / l) Povečano število levkocitov v peritonealni tekočini, od katerih je več kot 25 % nevtrofilcev, opazimo pri 90 % bolnikov s spontanim bakterijskim peritonitisom in pri 50 % bolnikov s cirozo jeter. Visoka vsebnost limfocitov je značilna za bolnike s tuberkuloznim peritonitisom ali hiloznim ascitesom. Za tuberkulozni peritonitis je značilno tudi veliko število mezotelijskih celic v peritonealni tekočini. Pri malignih tumorjih opazimo raven beljakovin več kot 3 g/dl (SI: 30 g/l), pri tuberkulozi več kot 4 g/dl (SI: 40 g/l). Pri bolnikih s tuberkuloznim peritonitisom in peritonealno karcinomatozo opazimo nizko raven glukoze v peritonealni tekočini.

Aktivnost alkalne fosfataze v peritonealni tekočini se poveča za več kot 2-krat v primerjavi z normalno aktivnostjo v krvnem serumu pri bolnikih z rupturo črevesja in zadavilno obstrukcijo tankega črevesa. Več kot dvakratno povečanje ravni amoniaka v primerjavi z normalno vrednostjo v krvnem serumu opazimo pri rupturi črevesja in zadavitvi tankega ali debelega črevesa, pri perforirani razjedi in perforiranem slepiču Razmerje vsebnosti beljakovin v peritonealni tekočini na njegovo vsebnost v krvnem serumu, ki je enaka ali večja od 0,5, značilna za maligni tumor, tuberkulozni ascites ali ascites trebušne slinavke in kaže na ekstrahepatični vzrok ascitesa. Razmerje manj kot 0,5 kaže na nezapleteno cirozo jeter. Gradient med nivojem albumina v ascitični tekočini in serumu več kot 1 g/dl (SI: več kot 10 g/l) kaže na kronični hepatitis, gradient manj kot 10 g/l je značilen za maligni tumor. S citološkim pregledom peritonealne tekočine lahko odkrijemo tumorske celice, z mikrobiološkim pregledom - E. coli, anaerobi in enterokoki, ki pridejo v trebušno votlino, ko poči votli organ, vnetni procesi notranjih organov (apendicitis, pankreatitis), tuberkuloza, bolezni jajčnikov. Identifikacija gram-pozitivnih kokov običajno kaže na primarni peritonitis. Pri histoplazmozi, kandidiazi ali kokcidioidomikozi se v peritonealni tekočini nahajajo glive.